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發布時間:2019-06-26

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感染非瘟後存活的豬並不會長期帶毒!99天後能完全控製和消滅病毒!

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本文轉自豬譯館、中科名獸醫、農牧前沿。整理了來自德國因塞爾裏姆斯弗裏德裏希-洛弗勒研究所的一份針對豬ASFV帶毒狀態的研究報告,實驗用了36頭豬,曆時165天,得到了一個明確的結果:陰性哨兵豬與實驗感染豬在感染後99天混欄沒有轉陽,實驗感染存活的豬組織中也沒有分離到病毒,表明存活下來的感染豬並不會長期帶毒,而是隨著時間的推移,病毒載量逐漸降低,並最後完全清除病毒。這一結果也與之前的幾項研究結果一致。


總體來說,沒有看到任何感染中等毒力的ASFV後仍然存活的豬存在帶毒狀態。血液中病毒基因組的長期可檢測性不僅是一個風險,也是一個診斷的機會。在至少90天內,PCR將能夠在受感染的豬身上檢測出病毒。


作者:A. Petrov | J. H. Forth | L. Zani | M. Beer | S. Blome

作者均是來自德國因塞爾裏姆斯弗裏德裏希-洛弗勒研究所診斷病毒學研究室和傳染病研究室的研究人員

編譯:豬譯館蔚飛


這項研究采用實驗使用被認為是I型的中等毒力的ASFV分離株(荷蘭86株)作為模型病毒,用36頭豬,30頭豬為實驗感染豬(C豬),6頭豬為陰性哨兵豬(S豬)。本實驗在C豬感染後的第164/165天結束。得到了一個明確的結果:實驗感染豬在感染後99天後,陰性哨兵豬與其混欄沒有轉陽,實驗感染存活的豬組織中也沒有分離到病毒,表明存活下來的感染豬並不會長期帶毒,而是隨著時間的推移,病毒載量逐漸降低,並最後完全清除病毒。研究要點摘錄如下:


一、30頭5~6月齡健康雜交家豬,用2ml含有2×104 HAU的荷蘭86株ASFV的細胞培養上清液用滴鼻的方式進行感染。在感染後的32天內,有10頭豬因ASFV死亡,1頭因中樞神經紊亂進行安樂死(28天時),有19頭存活。


二、存活的19頭豬中,9頭在感染91天內,ASFV特異性qPCR呈陰性,其餘10頭在91天後, ASFV特異性qPCR才呈陰性。


三、所有接種的豬都出現了包括發燒在內的臨床症狀。大多數的豬,在接種後4-6天就首次出現臨床評分和體溫升高,最晚的是接種後24天。急性期平均每頭豬持續8-10天(4-19天不等),臨床評分最大值為7-14分。


四、在試驗過程中,在所有30感染豬的血液樣本中均發現了非洲豬瘟病毒基因組和活病毒。首批陽性結果在3-21天檢測到。從第3天開始,qPCR陽性豬的數量穩步增加,直到29天時所有豬都出現陽性結果


五、在10和14天時檢測到最高的基因組載量,最大Cq值為18-19。在第29天,Cq值下降了6,在接種ASFV第42 天時,6頭豬首次出現qPCR陰性結果,48天達到7頭,63天達到10頭。91 天後,52%的C豬qPCR結果仍為陽性,且基因組載量下降(cq28 - 30)。


六、血吸附試驗在血清中首次檢測到ASFV與全血的qPCR結果一致。隨後,血吸附試驗陽性樣本量迅速下降,直到從第63天開始所有存活的豬呈陰性。從血液中清除需要>90天(盡管從第63天開始就檢測不到活病毒了),因此,ag真人视讯可以說病毒存留時間很長。鑒於ASFV被認為是安全地被包裹在紅細胞膜中(Bastos et al., 2003; Gallardo et al., 2009),這些結果可能與豬紅細胞的最大壽命是約65~85天有關(Liebich, 2003)。


七、在每隻實驗感染的豬的各種拭子樣本中(包括:糞拭子、口咽淺表拭子、口咽拭子),均觀察到了不同程度的散毒情況。口咽樣本的陽性結果更多,基因組載量更高(最大Cq值28),並且在接種後第63天都還能監測到陽性結果。到91天後所有樣本沒有檢測到陽性,可以猜測,91天後,才沒有散毒。


八、試驗期間,3頭C豬和1頭S豬因為非相關的原因被安樂死(接種28天時有1頭C豬,接種86天時有1頭C豬,128天時有1頭C豬,135天時有1頭S豬)。


九、在感染後的第99天,將存活的19頭C豬重新混群,並將6頭健康的S豬混入其中(每組2頭),這6頭S豬在暴露於C豬前也沒有ASFV和相關抗體。在暴露開始後的28天內,用血吸附試驗和常規PCR 對這些豬進行四次臨床評估和采樣,分別為感染後的第105、112、119和126 天。隨後,實驗措施集中在臨床觀察和必要時的病理形態學研究。直到試驗結束時,即人工感染後第164天,所有健康的s豬和所有存活的C豬,均未檢測出非洲豬瘟病毒。其中包括1頭S豬的11個胎兒脾髒樣本。


十、也就是說,在感染第99天後,幸存的豬能完全控製和消滅病毒,不會再散毒。


十一、但是如果有蜱蟲出現的話,情況就有可能不同,這個試驗討論的不是通過肌肉注射/靜脈注射感染易感動物,所以,如果要想成功複養,還必須消滅蜱蟲。


十二、在風險評估方麵,必須考慮到最壞的情況。如果野豬死於其他原因,那麽屍體就可能成為易感動物的一個感染源。在這種情況下,ag真人视讯必須考慮經口感染而不是非腸道途徑。


十三、由於試驗中最晚出現臨床症狀的豬是在感染後24天,所以最穩妥的做法可能是在觀察到臨床症狀後的第115天,即4個月後,才考慮複養計劃,可能更為穩妥。